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分光光度計的基本結構：
　　分光光度計與光電比色計相比，在結構上分光光度計用單色器代替了濾光片，其它部分兩者比較相似。
　　（－）單色器：單色器是指一個光學系統，它比濾光片能更有效地提供帶寬窄的單色光。單色器的主要組件是玻璃棱鏡、復合濾光片或光柵。來自光源的光線，可直接通過單色器的狹縫，照到分光部件上。單色器的效率比普通濾光片高。在紫外和可見光范圍內，半寬度不超過1nm。
　　1．棱鏡單色器
　　從幾何光學我們知道，當一束光從一種介質射到另一種介質時，在界面會發生折射和反射，如圖4-3所示。設入射角為i，折射角為θ，則其折射率n為:n = Sini/sinθ
　　不同的光學材料具有不同的折射率，這是*的。即使使用同一種光學材料，以相同的人射角照射，若波長不同，得到的折射角也不一樣。透明物質的折射率n和入射光波長的關系可以用下列經驗式表示：   n＝ A＋B/λ2＋C/λ4＋…
　　式中A、B、C的數值與物質的性質有關。從式中可以看出，波長越長，折射率越小。一束復合光進入棱鏡，由于不同波長的光，其折射率不同，通過棱鏡后，復色光就按不同的波長分開來了，如圖所示
　　實驗證明，棱鏡的色散具有非線性，即①譜線彎曲；②不同波長區域色散效果不同，紅端色散差，紫端色散較好。雖然在實際應用中的棱鏡單色器與圖示的不盡相同，然而它們的工作原理是一樣的。
　　2．光柵單色器
　　衍射光柵也可用作單色器。衍射光柵是由一系列刻劃在高光潔度反射表面上溝紋組成的。溝紋排列異常密集，每英寸長度上有15000或30000條。將光柵放在一平行光束里，光柵的一面被照亮，這一面可看作是塊非常小的反射鏡。
　　從溝紋反射鏡反射出的光線相重疊，發生干涉，如圖所示。另一方面，如果在光線方向上的溝紋條數是波長的整數倍時，光線就被溝紋分開，這種波就是同向的，射線被反射。當它不是波長的整數倍時，光線被抵消，沒有反射現象。改變光線照到光柵上的角度，就可以改變反射光的波長。
　　射線波長λ與反射角θ的關系，如下式：m λ= 2dsinθ
　　式中，d 是溝紋之間的距離，θ是光柵常數；m是干涉價數。
　　當m=1時，為一階譜；
　　m=2時，為二階譜。